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簡要描述：青旗（上海）生物技術(shù)發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺，在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對用戶負責(zé)的態(tài)度，以對科研的高度嚴謹，以嚴格的質(zhì)量控制，為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)！
更新時間：2021-05-27
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
瀏覽次數(shù)：907
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN607200613 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細胞名稱 | 人胰島細胞NES2Y |
| |
貨物編碼 | BFN607200613 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 27℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 2類 | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗 | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人胰島細胞NES2Y細胞提取于女性供體，為自發(fā)性永生化細胞系。 | ||
注釋 | Registration: International Depositary Authority, European Collection of Cell Cultures (ECACC); 98081006. Characteristics: Insulin secreting. Characteristics: Has a loss of function of ATP-regulated potassium channels. | ||
STR信息 | / | ||
參考文獻 | PubMed=9280302; DOI=10.1016/S0014-5793(97)00874-0 MacFarlane W.M., Cragg H., Docherty H.M., Read M.L., James R.F.L., Aynsley-Green A., Docherty K. Impaired expression of transcription factor IUF1 in a pancreatic beta-cell line derived from a patient with persistent hyperinsulinaemic hypoglycaemia of infancy (nesidioblastosis). FEBS Lett. 413:304-308(1997)
PubMed=10567373; DOI=10.1074/jbc.274.48.34059 MacFarlane W.M., Chapman J.C., Shepherd R.M., Hashmi M.N., Kamimura N., Cosgrove K.E., O'Brien R.E., Barnes P.D., Hart A.W., Docherty H.M., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Engineering a glucose-responsive human insulin-secreting cell line from islets of Langerhans isolated from a patient with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy. J. Biol. Chem. 274:34059-34066(1999)
PubMed=10866047; DOI=10.2337/diabetes.49.6.953 MacFarlane W.M., O'Brien R.E., Barnes P.D., Shepherd R.M., Cosgrove K.E., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Sulfonylurea receptor 1 and Kir6.2 expression in the novel human insulin-secreting cell line NES2Y. Diabetes 49:953-960(2000)
Patent=US6372501 Aynsley-Green A., Lindley K.J., Docherty K., Dunne M.J., MacFarlane W.M., James R.F.L. Glucose responsive beta-cell line. Patent number US6372501, 16-Apr-2002
PubMed=21099259; DOI=10.4161/isl.1.2.9432 Adams G.G., Uddin A., Vives-Pi M., Pujol-Borrell R., James R.F.L. Characterisation of the NES2Y cell line and its use in the production of human glucose-responsive insulin producing (hGRIP) cell lines by cell-cell fusion. Islets 1:117-123(2009)
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驗收細胞注意事項
1、收到人胰島細胞NES2Y細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人胰島細胞NES2Y細胞 ，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人胰島細胞NES2Y細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當(dāng)方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人胰島細胞NES2Y細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
地址：上海市浦東新區(qū)宏祥北路83號
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